采用粒径100-800 nm纳米磁珠与沙门氏菌特异性抗体,通过碳二亚胺缩合法制备沙门氏菌捕获分离用免疫磁珠,形成了已市场推广的沙门氏菌免疫磁珠产品,目标菌捕获效率90%,高于市场同类产品20%以上;将沙门氏菌免疫磁珠应用于牛奶中沙门氏菌的快速检测,通过沙门氏菌免疫磁珠对样品中目标菌的特异性免疫捕获,用以优化沙门氏菌常规检测前处理过程,磁分离获得的目标菌经过短时间(3 h)的增菌后,结合荧光定量PCR技术可在6 h内完成对牛奶中可能存在的沙门氏致病菌的检测,检测限为1-10 CFU/25g,比国标法节省96 h(4 d)的时间。免疫磁珠技术优势:采用粒径在100-800 nm范围内且具有单分散性的磁性微球制备免疫磁球,具有更大的比表面积,有利于固定更多的抗体,大大增加了表面抗原结合位点,更适用于微生物大分子抗原的免疫识别捕获,大幅度提高了微生物的免疫识别性能,该沙门氏菌免疫磁珠产品对1-10 CFU/mL捕获准确率达到100%。
检测方法技术优势:采用免疫磁分离沙门氏菌,而后进行目标菌的短暂增菌,该技术优势使得目标菌从大量的杂菌中分离出来能够得以在短时间内得到大量增殖,不仅提高了检测方法的准确性、灵敏性,而且大大减少了前处理时间。荧光定量PCR技术本身的优势在于快而准,与免疫磁分离技术优势相结合,使得检测方法更为快速、准确、特异、灵敏。该免疫磁珠制备技术及免疫磁分离技术能进行高效捕获成分复杂、浑浊的生物/环境样品中的痕量目标物,提高检测方法的灵敏度及适用性,在医疗诊断、食品安全、环境分析等领域中痕量有害物质灵敏检测具有广泛的应用前景。(2)建立的免疫磁分离技术作为前处理技术不仅能与PCR技术相结合,而且还能与其他检测技术相整合,如LAMP、数字PCR、ELISA等,使得各种检测技术应用性与适用性更强、加广泛。
知识产权及获奖情况:
获得专利1项;荣获中国分析测试协会科学技术奖 (青年奖)及北京市科学技术研究院2014年度优秀科技成果奖。